崗位職責(zé)
主導(dǎo)基于兔單個B細胞的抗體開發(fā):負責(zé)從免疫方案制定開始,貫穿B細胞分選、單細胞培養(yǎng)、抗體基因克隆、線性表達框(Linear Expression Cassette)構(gòu)建到重組抗體表達與純化的核心環(huán)節(jié)。
任職要求:
1. 精通B細胞技術(shù)平臺:熟練運用流式細胞術(shù)(FACS)進行抗原特異性B細胞的高效分離與篩選;掌握單細胞水平的B細胞培養(yǎng)、擴增及抗體分泌功能檢測。
2. 抗體基因挖掘與工程化:負責(zé)從陽性B細胞中高效克隆重鏈和輕鏈抗體基因,熟練進行V(D)J序列分析、種系進化推導(dǎo),并完成兔抗體人源化或親和力成熟等工程化改造設(shè)計。
3. 表達與純化工藝:建立并優(yōu)化兔單克隆抗體在CHO、HEK293或大腸桿菌等表達系統(tǒng)中的瞬時/穩(wěn)定表達工藝;精通蛋白A/G、親和層析、離子交換、疏水層析等純化技術(shù),獲得高純度、高活性抗體。
4. 生物活性表征與驗證:獨立完成重組抗體的生物活性鑒定,熟練運用WB、ELISA、流式細胞術(shù)(Fc段結(jié)合/抗原結(jié)合)、免疫熒光等多種表征手段,驗證抗體的特異性、親和力及功能活性。
5. 項目推進與技術(shù)沉淀:負責(zé)撰寫實驗記錄、工藝報告及SOP文檔;解決抗體制備過程中的技術(shù)瓶頸(如低產(chǎn)量、非特異性結(jié)合等),并推動技術(shù)平臺的標準化與規(guī)?;?。